VARIACIONES EN LOS PATRONES DE MOVIMIENTO ESPERMÁTICO DEL SEMEN DE ERIZO DE MAR (Paracentrotus lividus)

El consumo de las gónadas del erizo de mar (Paracentrotus lividus) ha generado algunas preocupaciones sobre su conservación dentro de las regiones costeras. Por esto, las tecnologías de reproducción asistida podrían contribuir al estudio de la biología reproductiva y la conservación de su diversidad. La movilidad
espermática son indicadores del potencial de fertilización y las tasas de eclosión en estas especies, por lo que su estimación es relevante. En el erizo de mar, el estudio de la movilidad y cinética espermática ha sido poco explorado. Las nuevas tecnologías de acceso libre para el análisis seminal favorecen el acceso a los investigadores y el estudio en diferentes especies. Objetivo. Analizar las variaciones en las estimaciones de la concentración y los patrones cinemáticos en semen de erizo de mar (Paracentrotus lividus) mediante dos sistemas computarizados de análisis seminal y los fotogramas por segundo. Materiales y métodos. Se utilizaron un total de 12 erizos ubicados en dos regiones de España. Estos animales se trasladaron con un papel húmedo hasta el laboratorio (15-20 °C), donde se realizó la colecta 24 horas después de la extracción del animal. Para la obtención del semen se utilizó 1 mL de KCL a 0,5% (0,5 M KCL/diluido en
agua destilada) que fue inyectado a través de la membrana peri estomacal cercana a la boca al menos cinco minutos antes de la disección. Luego, el semen fue extraído por medio de aspiración con una micropipeta de cada animal y se colocó en tubos eppendorf (15-20 °C). Se utilizó una cámara digital MQ003MG-CM (Proiser R+D) con capacidad de captura de 500 fotogramas por segundo (frame per second, FPS), para esto se utilizó el sistema ISAS v1 y su pestaña de ISAS-Capture donde se realizó la captura de los videos a 500 frames durante 1 segundo, utilizando un microscopio UB203 (UOP/ PROISER R+D) que contenía un objetivo de fase de contraste negativa de 10 x (AN 0.25). Se utilizó un portaobjeto con su respectivo cubre y como mínimo se capturaron cinco videos por cada muestra de semen. Los videos capturados a 500 fps fueron segmentados cada 50. Se utilizó el sistema ISAS® v1, CASA-Mot (Proiser R+D, Paterna, Spain) y el software OPEN CASA v2 (plugin of ImageJ software, acceso libre) para el análisis de la concentración, movilidad total y progresiva, así como para los parámetros cinemáticos del semen. Resultados. Hubo diferencias significativas (p<0,05) entre las estimaciones de los sistemas ISAS® v1 y Open CASA v2 para la concentración espermática (M/mL), movilidad total y progresiva (%), y los patrones cinemáticos. Además, se demostró un efecto del frame rate para las estimaciones de los patrones del movimiento espermático en erizo de mar (p<0,05). Conclusiones. Los sistemas de análisis seminal y la tasa de fotogramas influyen sobre la estimación de la concentración, movilidad y cinética espermática en el erizo de mar. Se sugiere la utilización de tasas de fotogramas más altas (400-500). La validación de tecnologías de acceso libre favorece la accesibilidad para los productores y su utilidad en otras especies de producción.