Evaluación de la edición génica como herramienta para mejora del estrés hídrico y calórico en pasto estrella (Cynodon nlemfuensis)

La producción de ganado vacuno es una actividad económica importante en Costa Rica, pero
actualmente enfrenta desafíos para alimentar a estos animales por aumentos de temperatura y los
periodos de sequía más extensos causados por el cambio climático. El objetivo de esta
investigación es evaluar la edición génica como herramienta para incorporar tolerancia al estrés
hídrico y calórico en el pasto estrella africana (Cynodon nlemfuensis). Este pasto se seleccionó por
su alto contenido proteico y su paleatividad.
Se seleccionarán genes de interés relacionados con el estrés calórico y estrés hídrico, luego se
diseñará un vector de transformación que permita el silenciamiento de dichos genes mediante
CRISPR/Cas9 y se realizará la transformación mediada por Agrobacterium. Las plantas
transformadas se regenerarán en medio Murashige y Skoog 1962, suplementado con 200 mg/L de
higromicina y 200 mg/L de cefotaxima). Las líneas seleccionadas como promisorias se analizarán
por PCR para verificar la presencia del gen Cas9 (como prueba de que se presentó una
incorporación del vector de transformación), posteriormente se llevarán a ambientes controlados y
se evaluará la tolerancia a estrés calórico al mantenerlas a 35, 40 y 45 ± 1 °C y un fotoperiodo de
16 horas luz (30.85 μmol/m2
·s). De igual forma, las líneas promisorias para tolerancia a estrés
hídrico serán sometidas a reducciones en la dosis de agua (400, 200,100 y 0 mL de agua a una
frecuencia de 4 a 5 días de riego) suministrada para su desarrollo. También se evaluará las
progenies de tres generaciones (F0, F1 y F2) así como las características agronómicas
(crecimiento de plantas, número de hojas, longitud de hojas, peso seco, peso fresco, cantidad
semilla, peso seco de la semilla, tiempo de crecimiento, morfologías y anatomías). Al finalizar la
investigación se espera contar con al menos dos líneas tolerantes al estrés hídrico, calórico o
ambas minimizando alteraciones en su rendimiento y morfología.

Evaluar la edición génica como herramienta para mejora del
estrés hídrico y calórico en pastos estrella africana (Cynodon nlemfuensis)

Sistemas de producción alternativos sostenibles